ATP熒光檢測(cè)儀的原理及操作步驟
更新時(shí)間:2024-05-31 瀏覽次數(shù):447
ATP熒光檢測(cè)儀的原理
ATP熒光檢測(cè)儀基于螢火蟲發(fā)光原理,利用“熒光素酶—熒光素體系"快速檢測(cè)三磷酸腺苷(ATP)。由于所有生物活細(xì)胞中含有恒量的ATP,所以ATP含量可以清晰地表明樣品中微生物與其他生物殘余的多少,用于判斷衛(wèi)生狀況。具體來說,細(xì)胞內(nèi)的ATP在熒光素酶的催化下會(huì)發(fā)出熒光,熒光強(qiáng)度與ATP濃度成正比。通過測(cè)量熒光強(qiáng)度,可以計(jì)算出細(xì)胞內(nèi)ATP的含量,進(jìn)而判斷細(xì)胞的存活狀態(tài)。
ATP熒光檢測(cè)儀的操作步驟
準(zhǔn)備工作:
確保ATP熒光檢測(cè)儀處于正常工作狀態(tài),檢查設(shè)備的電源是否接通,熒光模塊是否安裝牢固。
準(zhǔn)備樣品,按照樣品類型和ATP檢測(cè)的目的,選擇適當(dāng)?shù)牟蓸臃椒?。確保樣品的收集和處理過程符合操作規(guī)程。
準(zhǔn)備所需的物品,如ATP檢測(cè)儀、檢測(cè)筆、校準(zhǔn)液、樣品采集容器(如杯子或培養(yǎng)皿)、蒸餾純水、消毒劑等。
樣品采集:
使用對(duì)應(yīng)的采樣管或容器采集樣品,確保樣品采集過程中無污染,避免使用污染的儀器和容器。
校準(zhǔn):
打開ATP熒光檢測(cè)儀,等待一段時(shí)間使儀器的溫度穩(wěn)定。
選擇適合的校準(zhǔn)液,在ATP檢測(cè)儀的校準(zhǔn)區(qū)域進(jìn)行校準(zhǔn)操作。注意使用過期的校準(zhǔn)液可能會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。
熒光探針準(zhǔn)備:
校準(zhǔn)完成后,選擇正確的熒光探針,并將探針插入ATP檢測(cè)儀的檢測(cè)區(qū)域,等待儀器自動(dòng)校準(zhǔn)。
樣品檢測(cè):
將準(zhǔn)備好的樣品放置于ATP檢測(cè)儀的樣品區(qū)域內(nèi),按下檢測(cè)筆,讓檢測(cè)筆盡量貼近樣品液面。
等待熒光測(cè)量結(jié)果,ATP熒光快速檢測(cè)儀通常會(huì)在3秒內(nèi)給出樣品的ATP負(fù)載量(以RLU為單位),通常將結(jié)果標(biāo)記為通過或未通過。
結(jié)果讀取:
根據(jù)設(shè)備的使用手冊(cè),記錄檢測(cè)結(jié)果,包括樣品的ATP濃度。根據(jù)設(shè)備的閾值設(shè)置,判斷樣品是否合格。
清潔和維護(hù):
檢測(cè)完成后,關(guān)閉設(shè)備,清潔樣品槽和其他可能被污染的部分,確保儀器處于良好的狀態(tài)。
注意事項(xiàng)
嚴(yán)格按照使用手冊(cè)和操作規(guī)程進(jìn)行操作,避免因操作不當(dāng)導(dǎo)致的錯(cuò)誤結(jié)果。
根據(jù)需要進(jìn)行設(shè)備的校準(zhǔn)和標(biāo)定,校準(zhǔn)是保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性的關(guān)鍵步驟。
避免樣品的污染,確保樣品采集的容器和采樣工具的清潔和無污染。
注意ATP提取的條件,不同的樣品需要不同的提取條件,包括提取試劑的選擇和樣品與試劑的比例等。
注意ATP熒光檢測(cè)的參數(shù)設(shè)置,根據(jù)實(shí)際需求進(jìn)行設(shè)置。
通過遵循上述步驟和注意事項(xiàng),可以確保ATP熒光檢測(cè)儀的正確使用和結(jié)果的準(zhǔn)確性。